{"id":4869,"date":"2024-01-15T06:14:20","date_gmt":"2024-01-15T06:14:20","guid":{"rendered":"https:\/\/corp.farlong.com\/phytochemical-screening-and-biological-evaluation-of-greek-sage-salvia-fruticosa-mill-extracts\/"},"modified":"2024-11-14T17:08:47","modified_gmt":"2024-11-14T17:08:47","slug":"phytochemical-screening-and-biological-evaluation-of-greek-sage-salvia-fruticosa-mill-extracts","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/directcm.com\/es\/phytochemical-screening-and-biological-evaluation-of-greek-sage-salvia-fruticosa-mill-extracts\/","title":{"rendered":"Detecci\u00f3n fitoqu\u00edmica y evaluaci\u00f3n biol\u00f3gica de extractos de salvia griega (Salvia fruticosa Mill.)"},"content":{"rendered":"

Perfiles metabol\u00f3micos utilizando LC-Q-Orbitrap HRMS<\/span><\/p>\n

\n

En general, los estudios metabol\u00f3micos sobre Salvia<\/i> Las especies en modo de ionizaci\u00f3n negativa tienden a ser m\u00e1s eficientes que aquellas en modo positivo.15<\/a><\/sup>. En este estudio, el an\u00e1lisis de datos de MS incluy\u00f3 el uso de bases de datos locales y en l\u00ednea proporcionadas por el software Compound Discoverer 2.1. Adem\u00e1s, los datos recopilados de estudios metabol\u00f3micos previos sobre Salvia<\/i> Las especies se recolectaron y fusionaron en una lista masiva que se implementar\u00e1 como una base de datos local. En total se detectaron 2.704 picos de sustancias en S. fruticosa<\/i> extractos en an\u00e1lisis en modo de iones negativos. Despu\u00e9s de filtrar las se\u00f1ales menores (\u00c1rea < 104<\/sup>), hubo 98 metabolitos de los cuales 95 se identificaron tentativamente como se muestra en la tabla complementaria T1<\/a>.<\/p>\n

Los perfiles de metabolitos de cada extracto se yuxtapusieron y se presentaron en la Fig.\u00a01<\/a>a. Los grupos dominantes cambiaron entre diferentes extractos. En los obtenidos con disolventes que contienen mayoritariamente agua (SFH2<\/sub>O y SF30) los compuestos m\u00e1s abundantes fueron los \u00e1cidos fen\u00f3licos. La eficiencia de extracci\u00f3n de los compuestos terpenoides fue consistente con el aumento de etanol en el solvente usado debido a la naturaleza no polar de estos compuestos. Adem\u00e1s, un mapa de calor con la intensidad de la se\u00f1al de fitoqu\u00edmicos individuales detectados en cuatro diferentes S. fruticosa<\/i> extractos se presenta en la Fig.\u00a01<\/a>b. La clase de compuestos m\u00e1s numerosa detectada en los extractos estudiados fue la de los terpenoides con 35 compuestos, seguida de los flavonoides (24 compuestos), \u00e1cidos fen\u00f3licos y derivados (19 compuestos), sac\u00e1ridos (9 compuestos) y otros como \u00e1cidos grasos, \u00e1cidos carbox\u00edlicos y compuestos no identificados. .<\/p>\n

\n
Figura 1<\/b><\/figcaption>
\n
\"figure<\/picture><\/a><\/div>\n
\n

Cromatogramas de iones totales obtenidos por LC-Q-Orbitrap en modo negativo (negro) combinados con cromatogramas registrados por detector UV-Vis a 270 nm (naranja) (a<\/b>), configurado con un mapa de calor que representa el valor medio del \u00e1rea del pico de MS de los compuestos identificados en cuatro diferentes S. fruticosa<\/i> extractos: SFH2<\/sub>O-extracto acuoso; Extracto de etanol SF30\u201330%; extracto de etanol SF70\u201370%; SF100\u2013extracto de etanol (b<\/b>). Para conocer la identidad de los picos, consulte la tabla complementaria. T1<\/a>.<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/figure>\n<\/div>\n

En el caso de dos extractos m\u00e1s polares (SFH2<\/sub>O y SF30), los \u00e1cidos fen\u00f3licos fueron las clases m\u00e1s abundantes en el \u00e1rea total del pico. Esta clase estuvo representada principalmente por derivados del \u00e1cido cafeico. El tiempo de retenci\u00f3n (RT) del compuesto. 16<\/b> con ion precursor [MH]\u00af en m\/z<\/i> 179.03419 estaba en l\u00ednea con el RT de la norma del \u00e1cido cafeico. Tambi\u00e9n gener\u00f3 un fragmento importante caracter\u00edstico en m\/z<\/i> 135.04414, por p\u00e9rdida de di\u00f3xido de carbono. Se detect\u00f3 la forma desprotonada del \u00e1cido cafeico en compuestos 40<\/b> y 41<\/b>, que fueron identificados como \u00e1cido sager\u00ednico ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 719.16210) y \u00e1cido rosmar\u00ednico ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 359.0773). La identificaci\u00f3n del \u00e1cido rosmar\u00ednico se confirm\u00f3 adem\u00e1s mediante comparaci\u00f3n con el est\u00e1ndar. Se hab\u00eda observado el mismo ion o su p\u00e9rdida en compuestos 20<\/b>, 37<\/b>, 39<\/b>, 44<\/b>, 53<\/b>, 57<\/b> y 58<\/b>, que apoy\u00f3 en comparaci\u00f3n con la literatura y MS2<\/sup> fragmentaci\u00f3n, fueron identificados como salviaflasida ([MH]\u00af m\/z<\/i> 521.13012), \u00e1cido salvian\u00f3lico B ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 717.14661), \u00e1cido isosalvian\u00f3lico B ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 717.14667), \u00e1cido salvian\u00f3lico K ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 555.11469), dos is\u00f3meros F del \u00e1cido salvian\u00f3lico ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 313.07205) y \u00e1cido salvian\u00f3lico C ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 491.09863).<\/p>\n

En el caso de los dos extractos m\u00e1s apolares (SF70, SF100) la contribuci\u00f3n de terpenoides fue la mayor, mientras que en los extractos restantes esta clase represent\u00f3 aproximadamente una cuarta parte de la suma del \u00e1rea del pico de los compuestos identificados. Esta clase estuvo representada principalmente por los diterpenoides, que fueron la clase de compuestos no polares m\u00e1s variada identificada en los extractos estudiados. En su mayor\u00eda eran diterpenoides de tipo abietano, cuya fragmentaci\u00f3n mediante ionizaci\u00f3n negativa a menudo inclu\u00eda la eliminaci\u00f3n de CO.2<\/sub> (-44 Da), CO (-28 Da), H2<\/sub>O (-18 Da), \u00b7CH3<\/sub> (15 Da). Compuestos 59<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 345.17075) y 64<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 345.17100) ambos mostraron iones atribuibles a la p\u00e9rdida de mol\u00e9cula de di\u00f3xido de carbono (m\/z<\/i> 301.18097) y mol\u00e9cula de agua (m\/z<\/i> 283.17038 y m\/z<\/i> 283.17041), y fueron identificados como rosmanol y epiisorosmanol. Compuesto 69<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 329.17580) fue identificado como carnosol bas\u00e1ndose en su patr\u00f3n de fragmentaci\u00f3n t\u00edpico, comenzando con la p\u00e9rdida de di\u00f3xido de carbono (m\/z<\/i> 285.16604)12<\/a>,15<\/a><\/sup> y seguido de la eliminaci\u00f3n de un radical metilo (m\/z<\/i> 270.16211). El mismo patr\u00f3n de fragmentaci\u00f3n ocurri\u00f3 en compuestos 80,<\/b> identificado como \u00e1cido 12-metoxicarn\u00f3sico ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 345.20721) con fragmentos de 301.21689 y 286.19385. Compuesto 78<\/b>, con un ion pseudomolecular en m\/z<\/i> 331.19153 [MH]\u00af fue identificado como \u00e1cido carn\u00f3sico debido a la presencia de fragmentos correspondientes a la p\u00e9rdida de di\u00f3xido de carbono y posterior p\u00e9rdida de un radical isopropilo (m\/z<\/i> 287.20175 y 244.14687). Compuesto 70<\/b> mostr\u00f3 un ion precursor en [MH]\u00af en m\/z<\/i> 343.15524, que gener\u00f3 fragmentos caracter\u00edsticos m\/z<\/i> 315.16028 y m\/z<\/i> 299.160504 mediante la p\u00e9rdida de etileno y di\u00f3xido de carbono, respectivamente. Esto nos permite identificar compuestos. 70<\/b> como rosmadial. Tambi\u00e9n se detectaron dos triterpenoides pentac\u00edclicos en los extractos analizados: compuesto 96<\/b> y 97<\/b>, que fueron identificados tentativamente como \u00e1cido betul\u00ednico y \u00e1cido urs\u00f3lico, respectivamente, con iones cuasimoleculares en ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 455.35340). La presencia de estos triterpenoides tambi\u00e9n se inform\u00f3 en S. fruticosa<\/i> por Jash et al.16<\/a><\/sup>.<\/p>\n

En los extractos estudiados, especialmente aquellos con alto contenido de agua (SFH2<\/sub>O, SF30), tambi\u00e9n se observ\u00f3 una proporci\u00f3n significativa de oligosac\u00e1ridos y \u00e1cidos de az\u00facar en el \u00e1rea total del pico de los compuestos identificados. Compuestos 1<\/b>, 2<\/b> y 3<\/b> se identificaron tentativamente como estaquiosa, rafinosa y sacarosa, ya que a menudo son az\u00facares de transporte importantes en el Salvia<\/i> especies31<\/a><\/sup>. Compuestos 4\u20138<\/b> fueron clasificados como \u00e1cidos de az\u00facar. El patr\u00f3n de fragmentaci\u00f3n del compuesto. 6<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 135.02875) era id\u00e9ntica a la de yo<\/span>-\u00e1cido tre\u00f3nico. Compuesto 8<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 149.0081) fragmentos generados m\/z<\/i> 72.99171, 59.01249 y 87.00734 que se pueden observar en modo de ionizaci\u00f3n negativa para yo<\/span>-(+)-\u00e1cido tart\u00e1rico.<\/p>\n

Otra clase importante de fitoqu\u00edmicos detectados en S. fruticosa<\/i> extractos fueron flavonoides. La mayor\u00eda de los compuestos identificados que pertenecen a esta clase se han asignado a las flavonas. Compuesto 24<\/b> se identific\u00f3 inequ\u00edvocamente como escutelarina al comparar los tiempos de retenci\u00f3n, los espectros UV y los patrones de fragmentaci\u00f3n MS\/MS con los del est\u00e1ndar comercial. Compuestos 46<\/b> y 55<\/b> mostr\u00f3 casi los mismos iones precursores [MH]\u00af en m\/z<\/i> 299.0563 y 299.0562. Compuesto 46<\/b> produjo los fragmentos m\u00e1s abundantes en m\/z<\/i> 284.03253 y 136.98682, igualmente compuestos 55<\/b>. Estos datos se corresponden con el patr\u00f3n de fragmentaci\u00f3n de hispidulina o diosmetina. Dado que hubo una diferencia en el tiempo de retenci\u00f3n, ambos compuestos podr\u00edan estar presentes en S. fruticosa<\/i> extractos. Compuesto 49<\/b> mostr\u00f3 un ion precursor en [MH]\u00af en m\/z<\/i> 285.04065 que form\u00f3 iones de productos espec\u00edficos en m\/z<\/i> 133.02834, 151.00261, 175.03903, en l\u00ednea con los informados para la luteolina por Velamuri et al.17<\/a><\/sup>. Compuesto 52<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 327.21786) fue identificada como salvigenina (pectolinarigenin-7-metil \u00e9ter), ya que esta flavona se inform\u00f3 anteriormente en S. fruticosa<\/i>. Compuesto 54<\/b> produjo el pico base [MH]\u00af en m\/z<\/i> 269.04578. Iones precursores e iones productos en m\/z<\/i> 117.03332 y 151.00264 confirmaron que este compuesto es apigenina. Compuesto 56<\/b> dio el ion precursor [MH]\u00af en m\/z<\/i> 329.0668, indicando que su f\u00f3rmula molecular era C17<\/sub>h14<\/sub>oh7<\/sub>. Produjo iones de fragmentos prominentes en m\/z<\/i> 299.01981 atribuible a la p\u00e9rdida de dos grupos metilo, y 271.02472, a causa de una mayor eliminaci\u00f3n de mon\u00f3xido de carbono. Por tanto, este pico se identific\u00f3 como jaceosidina. Compuesto 60<\/b> se identific\u00f3 como cisimaritina basada en un ion precursor [MH]\u00af en m\/z<\/i> 313.07190 y los iones del producto de diagn\u00f3stico en m\/z<\/i> 298.04694 y 283.02478, que indica la p\u00e9rdida de dos radicales metilo y 255.02974 por la eliminaci\u00f3n de mon\u00f3xido de carbono. Compuesto 62<\/b> ([MH]\u00af en m\/z<\/i> 283.06137) corresponde a un derivado de apigenina considerando el fragmento en m\/z<\/i> 268.03772 y 117.03318. I\u00f3n de fragmento caracter\u00edstico en m\/z<\/i> 240.04193 formado por la p\u00e9rdida de mon\u00f3xido de carbono condujo al compuesto 62<\/b> siendo identificado como genkwanin. Los patrones de fragmentaci\u00f3n de apigenina, hispidulina, cirsimaritina y genkwanina fueron consistentes con los informados por Koutsoulas et al.12<\/a><\/sup>. Compuesto 50<\/b> fue el \u00fanico tipo de flavonol aglic\u00f3n detectado en los extractos estudiados. Con el ion precursor [MH]\u00af en m\/z<\/i> 315.0513 y fragmento principal de MS\/MS en m\/z<\/i> 300.02756 resultante de la p\u00e9rdida del grupo metilo, este compuesto se identific\u00f3 como isorhamnetina. Compuesto 30<\/b> con un ion pseudomolecular [MH]\u00af en m\/z<\/i> 609.18329 no mostr\u00f3 ninguna fragmentaci\u00f3n, pero como se inform\u00f3 anteriormente en S. fruticosa<\/i>18<\/a>,19<\/a><\/sup>, se identific\u00f3 provisionalmente como flavanona: hesperidina. Los gluc\u00f3sidos flavonoides encontrados en este estudio fueron principalmente gluc\u00f3sidos con fragmento caracter\u00edstico de 162 Da, glucur\u00f3nidos (176 Da) y rutin\u00f3sidos (308 Da). Gluc\u00f3sido de luteolina (compuesto 22<\/b> con [MH]\u00af en m\/z<\/i> 447.09344) est\u00e1 presente en la mayor\u00eda de las publicaciones sobre la composici\u00f3n qu\u00edmica de S. fruticosa<\/i> extractos12<\/a>,18<\/a>,19<\/a>,20<\/a>,21<\/a><\/sup>. Compuesto 26<\/b> mostr\u00f3 un ion precursor [MH]\u00af en m\/z<\/i> 491.0836 y fue identificado como glucur\u00f3nido de isorhamnetina, informado anteriormente en S. fruticosa<\/i> s\u00f3lo por G\u00fcrb\u00fcz et al.22<\/a><\/sup>. Compuesto 27 (<\/b>[MH]\u00af en m\/z<\/i> 577.15668), identificado como apigenina-rutin\u00f3sido, tambi\u00e9n fue encontrado en la salvia griega por Cvetkovikj et al.21<\/a><\/sup>.<\/p>\n

La presencia de \u00e1cidos grasos tambi\u00e9n se observ\u00f3 en S. fruticosa<\/i> extractos. Compuestos 63<\/b> y 73<\/b> fueron identificados tentativamente como dos \u00e1cidos grasos poliinsaturados. Compuesto 63<\/b> fue asignado como \u00e1cido dihidroxioctadecadienoico (C18<\/sub>h31<\/sub>oh4<\/sub>\u00af). Compuesto 73<\/b> produjo el ion precursor [MH]\u00af en m\/z<\/i> 295.22803 y fragmentos caracter\u00edsticos en metro<\/i>\/z<\/i>\u00a0277.21738 ([MHH2<\/sub>Oh]\u2212<\/sup> y 195.13837 [M-(CHO-(CH2<\/sub>)4<\/sub>-CH3<\/sub>)-H]\u00af, que indica la posici\u00f3n del grupo hidroxilo en el \u00e1tomo de carbono 13. As\u00ed, se identific\u00f3 como \u00e1cido 13-hidroxi-9,11-octadecadienoico. Tambi\u00e9n en S. fruticosa<\/i> extrae la presencia del gluc\u00f3sido del \u00e1cido tuber\u00f3nico (m\/z<\/i> 387.16644) (compuesto 14<\/b>) que es una hormona del crecimiento.<\/p>\n

An\u00e1lisis cuantitativo de los principales fitoqu\u00edmicos.<\/h3>\n

Una cuantificaci\u00f3n de los principales compuestos fen\u00f3licos en diversos extractos de S. fruticosa<\/i> del peso seco del material vegetal (mg\/g PS) se presenta en la Tabla 1<\/a>. El contenido de \u00e1cido cafeico, escutelarina, \u00e1cido salvian\u00f3lico B, \u00e1cido rosmar\u00ednico, \u00e1cido carn\u00f3sico y carnosol se calcul\u00f3 bas\u00e1ndose en curvas de calibraci\u00f3n de est\u00e1ndares aut\u00e9nticos, mientras que el contenido de otros compuestos se estim\u00f3 en relaci\u00f3n con el est\u00e1ndar m\u00e1s similar disponible.<\/p>\n

\n
Tabla 1 Contenido de compuestos fen\u00f3licos principales (mg\/g PS) determinado en cuatro diferentes S. fruticosa<\/i> extractos (SFH2<\/sub>O-extracto acuoso; Extracto de etanol SF30\u201330%; extracto de etanol SF70\u201370%; SF100-etanol) por HPLC-PDA.<\/b><\/figcaption><\/figure>\n<\/div>\n

En general, el compuesto m\u00e1s abundante en los extractos de salvia es el \u00e1cido rosmar\u00ednico, que es un \u00e1cido fen\u00f3lico y un d\u00edmero del \u00e1cido cafeico. La concentraci\u00f3n m\u00e1s alta de \u00e1cido rosmar\u00ednico entre todas las muestras analizadas se encontr\u00f3 en SF70 (31,56 \u00b1 1,88 mg\/g DW), que es como la concentraci\u00f3n de \u00e1cido rosmar\u00ednico en S. fruticosa<\/i> recolectado en Croacia (29,10 \u00b1 0,21 mg\/g PS), informado por Mervi\u0107 et al.23<\/a><\/sup>. Se inform\u00f3 un contenido a\u00fan mayor (60,73 mg\/g PS) en el extracto metan\u00f3lico de la variedad griega de salvia estudiada por Sarrou et al.19<\/a><\/sup>, pero en este estudio el uso de alcohol puro como disolvente no dio como resultado el mayor rendimiento de \u00e1cido rosmar\u00ednico. Concentraci\u00f3n de \u00e1cido rosmar\u00ednico en la infusi\u00f3n (SFH2<\/sub>O) fue mucho menor (4,96 \u00b1 0,65 mg\/g PS) que en otros extractos, lo que no concuerda con los hallazgos de una comparaci\u00f3n similar realizada para la variedad turca de S. fruticosa<\/i> por Tekin18<\/a><\/sup>. Tambi\u00e9n se detect\u00f3 \u00e1cido cafeico en todos los extractos estudiados en concentraciones similares (0,13\u20130,15 mg\/g PS), que fueron diez veces inferiores a las informadas por Mervi\u0107 et al.23<\/a><\/sup>. Sin embargo, pocos \u00e1cidos salvian\u00f3licos, que pertenecen a los principales tr\u00edmeros derivados del \u00e1cido cafeico en las plantas de salvia, estaban presentes en mayores cantidades. La mayor concentraci\u00f3n de \u00e1cido salvian\u00f3lico B se obtuvo en los extractos SF70 y SF30 (6,86 \u00b1 0,93 mg\/g PS y 6,52 \u00b1 0,48 mg\/g PS). El \u00e1cido salvian\u00f3lico K fue el m\u00e1s abundante en el extracto ST30 con una concentraci\u00f3n de 6,25 \u00b1 1,0 mg\/g PS. Seg\u00fan los datos presentados por Cvetkovikj et al.21<\/a><\/sup>, la concentraci\u00f3n m\u00e1xima de \u00e1cido salvian\u00f3lico K entre varias poblaciones griegas estudiadas de S. fruticosa<\/i> fue de 7,20 mg\/g PS.<\/p>\n

Los compuestos terpenoides m\u00e1s abundantes en S. fruticosa<\/i> son el \u00e1cido carn\u00f3sico y el carnosol, ambos pertenecientes a la familia de los diterpenoides abietanos.12<\/a><\/sup>. El mayor contenido de \u00e1cido carn\u00f3sico se observ\u00f3 en SF100 (14,82 \u00b1 1,66 mg\/g PS), seguido por SF70 (13,88 \u00b1 2,52 mg\/g PS), que no es estad\u00edsticamente diferente. Estos resultados est\u00e1n en l\u00ednea con el contenido medido en extracto metan\u00f3lico por Kallimanis et al.24<\/a><\/sup> que fue de 12,5 \u00b1 1,6 mg\/g PS. La cantidad de carnosol en el extracto SF70 fue de 7,88 \u00b1 1,33 mg\/g PS y fue consistente con lo informado por Sarrou et al.19<\/a><\/sup>. El salviol, el tercer terpenoide m\u00e1s abundante en los extractos estudiados, es un meroterpenoide derivado del diterpenoide abietano (ferruginol) y es com\u00fan en otras especies griegas de salvia, por ejemplo. S. pomifera<\/i>25<\/a><\/sup>. Este compuesto a\u00fan no ha sido reportado en S. fruticosa<\/i>; sin embargo estuvo presente en la mayor\u00eda de los extractos estudiados con el mayor contenido: 7,37 \u00b1 0,71 mg\/g PS en SF70.<\/p>\n

El tercer grupo de bioactivos detectado en S. fruticosa<\/i> Los extractos eran flavonoides. La escutelarina es uno de los flavonoides comunes que se encuentran en la salvia.26<\/a><\/sup>. Fue el flavonoide m\u00e1s abundante en los extractos estudiados con un rendimiento similar: 7,77 \u00b1 0,48 mg\/g PS, 8,92 \u00b1 1,56 mg\/g PS y 7,35 \u00b1 0,9 mg\/g PS en SFH.2<\/sub>Extractos O, SF30 y SF70, respectivamente. Las concentraciones de luteolina rutin\u00f3sido y luteolina gluc\u00f3sido fueron similares en todos los extractos estudiados y oscilaron entre 1,03 y 1,98 mg\/g PS, lo que no concuerda con los datos informados por Tekin et al.18<\/a><\/sup>, donde las concentraciones de estos compuestos en las infusiones de salvia eran dos o tres veces mayores que en los extractos de etanol.<\/p>\n

Los \u00e1cidos fen\u00f3licos, flavonoides y terpenoides son compuestos bioactivos t\u00edpicos en S. fruticosa<\/i>. Como se muestra en la tabla 1<\/a>, el rendimiento de la extracci\u00f3n se vio muy afectado por el contenido de etanol en el disolvente. La extracci\u00f3n con etanol 70% proporcion\u00f3 el mayor rendimiento total de bioactivos, en contraste con la extracci\u00f3n solo con agua. La diferencia es claramente visible en el rendimiento de \u00e1cidos fen\u00f3licos y terpenoides, que en SF70 fue tres veces mayor y siete veces mayor, respectivamente. El rendimiento m\u00e1ximo de extracci\u00f3n de flavonoides se obtuvo con etanol 30%, pero fue s\u00f3lo ligeramente superior al obtenido con etanol 70%. Considerando todos los grupos de bioactivos estudiados, se concluye que el etanol 70% es el mejor solvente entre los probados para la extracci\u00f3n de compuestos bioactivos de S. fruticosa<\/i>.<\/p>\n

Actividad antioxidante<\/h3>\n

La presencia de compuestos que exhiben actividad antioxidante en el material vegetal se ha convertido en un aspecto importante que define sus propiedades promotoras de la salud. En el caso de diversas especies de salvia, su alta actividad antioxidante est\u00e1 provocada principalmente por compuestos fen\u00f3licos. En los estudios presentados, la actividad antioxidante total se determin\u00f3 para S. fruticosa<\/i> extractos preparados con extractantes de diferente polaridad. Adem\u00e1s, se determin\u00f3 la actividad antioxidante de compuestos fen\u00f3licos seleccionados t\u00edpicos de la salvia y que pertenecen a diversas clases de metabolitos secundarios, como \u00e1cidos fen\u00f3licos, flavonas y diterpenoides.<\/p>\n

El estudio presentado compar\u00f3 los resultados de las tres pruebas espectrofotom\u00e9tricas m\u00e1s populares que utilizan reactivos ABTS, DPPH y Folin-Ciocalteu (F-C). Los ensayos ABTS y DPPH se utilizan ampliamente para determinar la actividad eliminadora de radicales libres de los extractos, al igual que los compuestos puros. Para S. fruticosa<\/i> En extractos, la actividad antioxidante calculada describe el n\u00famero de mol\u00e9culas de ABTS o DPPH reducidas por antioxidantes derivados de 1 g de material seco despu\u00e9s de 10 minutos de reacci\u00f3n. Estos valores se calcularon en el rango lineal del m\u00e9todo y se expresaron como la pendiente de la l\u00ednea que describe la relaci\u00f3n entre el n\u00famero de milimoles reducidos de oxidantes y diversas cantidades de muestras analizadas, como gramos de materia seca en las mezclas de reacci\u00f3n (Fig.\u00a02<\/a>b).<\/p>\n

\n
Figura 2<\/b><\/figcaption>
\n
\"figure<\/picture><\/a><\/div>\n
\n

La actividad antioxidante de los est\u00e1ndares (\u00e1cido cafeico, escutelarina, \u00e1cido salvian\u00f3lico B, \u00e1cido rosmar\u00ednico, \u00e1cido carn\u00f3sico, carnosol y trolox) y S. fruticosa<\/i> extractos: SFH2<\/sub>O-extracto acuoso; Extracto de etanol SF30\u201330%; extracto de etanol SF70\u201370%; SF100-extracto de etanol, probado in vitro con reactivos ABTS, DPPH y F-C presentados como gr\u00e1ficos que muestran las curvas de dependencia del reactivo reducidas por los est\u00e1ndares probados (a<\/b>) o extractos (b<\/b>) y expresado como pendientes de las curvas iguales a los milomoles de reactivo reducidos en 1 g de muestra analizada (C<\/b>) conjunto con los perfiles antioxidantes de los extractos, registrados a 734 nm despu\u00e9s de la derivatizaci\u00f3n post-columna con ABTS, con las principales clases de antioxidantes en los gr\u00e1ficos circulares (d<\/b>). Para conocer la identidad de los picos, consulte la tabla complementaria. T1<\/a>.<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/figure>\n<\/div>\n

El estudio tambi\u00e9n incluye el m\u00e9todo con el reactivo de Folin-Ciocalteu. Consiste en la transferencia de electrones en un ambiente alcalino desde compuestos con grupos hidroxilo activos a complejos de \u00e1cido fosfot\u00fangstico fosfomol\u00edbdico. La capacidad reductora en este caso se expres\u00f3 como el n\u00famero de milimoles de equivalentes de \u00e1cido g\u00e1lico, que formaron el complejo azul y se derivaron de 1 g de materia seca de la planta. Se utiliz\u00f3 el mismo enfoque para las sustancias puras seleccionadas presentes en la salvia, como: \u00e1cido cafeico, \u00e1cido carn\u00f3sico, carnosol, \u00e1cido salvian\u00f3lico B, escutelarina, \u00e1cido rosmar\u00ednico y adicionalmente para el antioxidante de referencia: trolox (Fig.\u00a02<\/a>a). Este m\u00e9todo para determinar y calcular la actividad antioxidante de material vegetal y sustancias puras fue descrito previamente por Kusznierewicz et al.27<\/a><\/sup> y Baranowska et al.28<\/a><\/sup>, respectivamente. Los valores de pendiente resultantes se trazaron en ejes separados para cada prueba realizada para est\u00e1ndares y muestras (Fig.\u00a02<\/a>C). Cada uno de los est\u00e1ndares fen\u00f3licos probados exhibi\u00f3 actividad antioxidante, aumentando en orden de la siguiente manera: escutelarina <carnosol <\u00e1cido carn\u00f3sico <\u00e1cido salvian\u00f3lico B <\u00e1cido rosmar\u00ednico <\u00e1cido cafeico. Tres de ellos (\u00e1cido salvian\u00f3lico B, \u00e1cido rosmar\u00ednico y \u00e1cido cafeico) fueron m\u00e1s eficientes que el trolox, un compuesto com\u00fanmente utilizado como referencia en ensayos de determinaci\u00f3n de la actividad antioxidante. La actividad antioxidante de todos los extractos estudiados de S. fruticosa<\/i> dependi\u00f3 de la dosis en el ensayo ABTS as\u00ed como en la prueba DPPH. Por tanto, a medida que aumenta la cantidad de extracto a\u00f1adido a la mezcla de reacci\u00f3n, tambi\u00e9n aumenta el poder reductor hacia estos radicales. La actividad antioxidante total m\u00e1s baja se observ\u00f3 para el extracto SF100, seguida por casi dos veces mayor para el SFH.2<\/sub>O, y casi cuatro veces mayor para SF30 y SF70. Los resultados de la prueba F-C siguieron la misma tendencia que ABTS y DPPH con una correlaci\u00f3n de Pearson de 0,99, lo que indica que la actividad antioxidante de los extractos depende en gran medida del contenido de fen\u00f3licos, como lo demuestran Lantzouraki et al.29<\/a><\/sup>.<\/p>\n

Basado en el contenido de 6 fitoqu\u00edmicos seleccionados para las pruebas en los extractos (Tabla 1<\/a>) y las actividades antioxidantes determinadas para ellos y para los extractos (Fig.\u00a02<\/a>a,c), podemos determinar la contribuci\u00f3n estimada de estos compuestos a la actividad antioxidante total de los extractos individuales. En el caso de SFH2<\/sub>Los extractos O, SF30 y SF70, 6 compuestos seleccionados, seg\u00fan la prueba, cubrieron te\u00f3ricamente 21\u201330%, 45\u201363% y 64\u201386% de la actividad antioxidante total determinada, respectivamente. Estos resultados sugieren la posible presencia de otros antioxidantes adicionales en estos extractos y\/o sus efectos sin\u00e9rgicos. S\u00f3lo en el caso del extracto SF100 la suma de las actividades de los 6 compuestos est\u00e1ndar super\u00f3 la actividad total determinada de este extracto oscilando entre 20 y 49%, dependiendo de la prueba utilizada. Tal observaci\u00f3n puede ser el resultado de posibles interacciones antag\u00f3nicas entre los fitoqu\u00edmicos presentes en este tipo de extracto.<\/p>\n

Informaci\u00f3n m\u00e1s detallada sobre los tipos de antioxidantes presentes en los probados. S. fruticosa<\/i> Los extractos se proporcionaron mediante el uso de derivatizaci\u00f3n posterior a la columna de HPLC con el reactivo ABTS. Los perfiles antioxidantes obtenidos por este m\u00e9todo, as\u00ed como la contribuci\u00f3n de diferentes clases de antioxidantes en la actividad antioxidante total, se muestran en la Fig.\u00a02<\/a>d. Adem\u00e1s de los 6 antioxidantes est\u00e1ndar probados anteriormente, el S. fruticosa<\/i> Los extractos tambi\u00e9n conten\u00edan otros antioxidantes como \u00e1cido przewalsk\u00ednico A, salviaflasida, luteolina rutin\u00f3sido, gluc\u00f3sido de luteolina, glucur\u00f3nido de isorhamnetina, cumaroil cafeoilgluc\u00f3sido, \u00e1cido salvian\u00f3lico K y \u00e1cido salvian\u00f3lico F. Perfiles caracterizados por el mayor n\u00famero y tama\u00f1o de picos negativos que indican la reducci\u00f3n y decoloraci\u00f3n de Se observaron radicales ABTS para los extractos SF70 y SF30. A pesar de la similitud de los perfiles antioxidantes de estas dos muestras, la intensidad de las se\u00f1ales comunes fue mayor para el SF70 y tambi\u00e9n se observ\u00f3 actividad adicional procedente de los diterpenoides. S\u00f3lo en los perfiles de los extractos SF70 y SF100 se observaron picos negativos provenientes de los diterpenoides, con su participaci\u00f3n en la actividad antirradical total en 15 y 34%, respectivamente. El principal antioxidante en todos los extractos que conten\u00edan etanol fue el \u00e1cido rosmar\u00ednico, el \u00e1cido fen\u00f3lico m\u00e1s abundante y uno de los antioxidantes m\u00e1s fuertes entre los est\u00e1ndares estudiados. El mismo resultado tambi\u00e9n se inform\u00f3 para S. officinalis<\/i> y S. hispanica<\/i> extractos30<\/a>,31<\/a><\/sup>.<\/p>\n

En extracto acuoso (SFH2<\/sub>O) la actividad antioxidante se origin\u00f3 principalmente a partir de dos compuestos: el \u00e1cido przewalskinico A y la escutelarina, ya que la extracci\u00f3n con \u00e1cido rosmar\u00ednico solo con agua fue menos efectiva.<\/p>\n

Actividad inhibidora de la xantina oxidasa.<\/h3>\n

La enzima xantina oxidasa (XO) cataliza la oxidaci\u00f3n de hipoxantina y xantina a \u00e1cido \u00farico, cuyo exceso en la sangre provoca el desarrollo de gota. Durante la reoxidaci\u00f3n de XO, el ox\u00edgeno molecular act\u00faa como aceptor de electrones, produciendo un radical super\u00f3xido y per\u00f3xido de hidr\u00f3geno. En consecuencia, la XO se considera una importante fuente biol\u00f3gica de radicales super\u00f3xido que, junto con otras especies reactivas de ox\u00edgeno, contribuyen al estr\u00e9s oxidativo del organismo y participan en numerosos procesos patol\u00f3gicos como la inflamaci\u00f3n, la aterosclerosis, el c\u00e1ncer, el envejecimiento, etc.32<\/a><\/sup>. Un enfoque terap\u00e9utico reciente para el tratamiento de la hiperuricemia es inhibir la enzima XO. Se han desarrollado varios f\u00e1rmacos que contienen inhibidores de la XO (alopurinol, febuxostat), cuyo uso lamentablemente se asocia con determinados efectos secundarios. Por este motivo, existe una b\u00fasqueda constante de inhibidores naturales de la XO que puedan suponer una alternativa a estos compuestos sint\u00e9ticos. Hay algunos informes en la literatura sobre la capacidad de varias especies de Salvia<\/i> (S. plebeia, S. miltiorrhiza, S. verbenaca<\/i>) para inhibir la XO33<\/a>,34<\/a>,35<\/a><\/sup>, por lo tanto, la posible ocurrencia de esta actividad tambi\u00e9n fue probada en los estudios estudiados. S. fruticosa<\/i> extractos. Adem\u00e1s, tambi\u00e9n se determin\u00f3 la actividad inhibidora de XO en compuestos fen\u00f3licos seleccionados t\u00edpicos de la salvia, tales como: \u00e1cido cafeico, \u00e1cido carn\u00f3sico, carnosol, \u00e1cido salvian\u00f3lico B, escutelarina, \u00e1cido rosmar\u00ednico y adicionalmente, como referencia, el inhibidor de XO alopurinol.<\/p>\n

La transformaci\u00f3n de xantina (sustrato) en \u00e1cido \u00farico (producto) por XO con o sin la presencia de muestras analizadas se monitore\u00f3 con el uso de HPLC-PAD a 285 nm (Fig.\u00a03<\/a>a). La actividad enzim\u00e1tica se calcul\u00f3 como el porcentaje del \u00e1rea del pico de \u00e1cido \u00farico formado en presencia de la muestra analizada en comparaci\u00f3n con el control sin la adici\u00f3n de la muestra (Fig.\u00a03<\/a>b). La inhibici\u00f3n de la enzima XO se expres\u00f3 como IC.50<\/sub> valor, es decir, la masa de est\u00e1ndar o peso seco de la muestra (\u03bcg) capaz de reducir la actividad enzim\u00e1tica a 50% (Fig.\u00a03<\/a>antes de Cristo).<\/p>\n

\n
figura 3<\/b><\/figcaption>
\n
\"figure<\/picture><\/a><\/div>\n
\n

Los ejemplos de cromatogramas de HPLC a 285 nm de mezclas posteriores a la reacci\u00f3n que contienen (desde arriba): xantina; xantina y xantina oxidasa (XO); xantina, XO e inhibidor (a<\/b>), que sirvieron de base para la preparaci\u00f3n de los gr\u00e1ficos que representan las curvas de actividad XO en presencia de est\u00e1ndares probados (\u00e1cido cafeico, escutelarina, \u00e1cido salvian\u00f3lico B, \u00e1cido rosmar\u00ednico, \u00e1cido carn\u00f3sico, carnosol y alopurinol) o S. fruticosa<\/i> extractos (SFH2<\/sub>O-extracto acuoso; Extracto de etanol SF30\u201330%; extracto de etanol SF70\u201370%; SF100 \u2013 extracto de etanol) (b<\/b>), que se utilizaron para determinar el par\u00e1metro IC50,<\/sub> es decir, los microgramos de muestra analizada necesarios para reducir la actividad XO a 50% (C<\/b>).<\/p>\n<\/div>\n<\/div>\n<\/figure>\n<\/div>\n

Se utiliz\u00f3 como referencia el conocido inhibidor de XO alopurinol, con una IC50<\/sub> valor de 0,15 \u00b5g (5,5 \u00b5M). Todos los est\u00e1ndares estudiados mostraron actividad inhibidora de XO con un IC.50<\/sub> que van desde 0,1 a 3,15 \u03bcg (2,8 a 43,8 \u03bcM). La actividad inhibidora de XO aument\u00f3 en el siguiente orden: \u00e1cido rosmar\u00ednico <\u00e1cido carn\u00f3sico <escutelarina <\u00e1cido salvian\u00f3lico B <carnosol <\u00e1cido cafeico. El \u00e1cido cafeico mostr\u00f3 el IC m\u00e1s bajo.50<\/sub> valor (0,1 \u03bcg; 2,8 \u03bcM), que indica la actividad inhibidora de XO m\u00e1s fuerte entre los compuestos probados. Fue incluso m\u00e1s potente que el alopurinol, lo que no concuerda con los datos presentados por Wan et al.36<\/a><\/sup> y Flemmig et al.37<\/a><\/sup>, donde el CI50<\/sub> de \u00e1cido cafeico fue casi 8 o 2 veces menor que la de alopurinol, respectivamente. Estas diferencias pueden deberse al origen de la XO seleccionada para las pruebas. En los estudios citados se utiliz\u00f3 una oxidasa procedente de leche bovina, mientras que para este estudio se seleccion\u00f3 una oxidasa microbiana. En este estudio, el \u00e1cido rosmar\u00ednico tuvo el nivel m\u00e1s bajo para inhibir la XO (3,2 \u03bcg; 43,8 \u03bcM), pero Ghallab et al.38<\/a><\/sup> informaron que la combinaci\u00f3n sin\u00e9rgica de alopurinol y \u00e1cido rosmar\u00ednico puede reducir la dosis necesaria de drogas sint\u00e9ticas. XO fue inhibida por todos los estudiados S. fruticosa<\/i> extractos, aunque m\u00e1s de 1000 veces menos eficaz que el alopurinol, en l\u00ednea con los datos informados para otros Salvia<\/i> especies. La escutelarina y otras flavonas se han descrito previamente como potentes inhibidores de la XO.39<\/a><\/sup>. A pesar de que s\u00f3lo hubo una ligera diferencia en el contenido de flavonoides totales entre el extracto SF30 y SF70, y que el contenido de otros compuestos antiinflamatorios fue m\u00e1s favorable para el extracto SF70, el SF30 tuvo la mayor capacidad para inhibir la actividad XO. El CI50<\/sub> El valor de SF30 fue de 50 \u03bcg y, seg\u00fan este par\u00e1metro, se determin\u00f3 la actividad antiinflamatoria potencial de SF70, SF100 y SFH.2<\/sub>Se determin\u00f3 que los extractos de O eran 3, 4 y 5 veces m\u00e1s d\u00e9biles, respectivamente.<\/p>\n<\/div>\n

[anuncio_2]<\/p>\n

Enlace fuente <\/a><\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

This study explores the influence of extraction solvents on the composition and bioactivity of Salvia fruticosa extracts. Ultrasound-assisted extraction with water, ethanol and their mixtures in variable proportions was used to produce four different extracts.<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":5372,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"site-sidebar-layout":"default","site-content-layout":"","ast-site-content-layout":"default","site-content-style":"default","site-sidebar-style":"default","ast-global-header-display":"","ast-banner-title-visibility":"","ast-main-header-display":"","ast-hfb-above-header-display":"","ast-hfb-below-header-display":"","ast-hfb-mobile-header-display":"","site-post-title":"","ast-breadcrumbs-content":"","ast-featured-img":"","footer-sml-layout":"","theme-transparent-header-meta":"default","adv-header-id-meta":"","stick-header-meta":"","header-above-stick-meta":"","header-main-stick-meta":"","header-below-stick-meta":"","astra-migrate-meta-layouts":"set","ast-page-background-enabled":"default","ast-page-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-4)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"ast-content-background-meta":{"desktop":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"tablet":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""},"mobile":{"background-color":"var(--ast-global-color-5)","background-image":"","background-repeat":"repeat","background-position":"center center","background-size":"auto","background-attachment":"scroll","background-type":"","background-media":"","overlay-type":"","overlay-color":"","overlay-gradient":""}},"footnotes":""},"categories":[9],"tags":[],"class_list":["post-4869","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-supplements"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/4869","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/users\/1"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/comments?post=4869"}],"version-history":[{"count":2,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/4869\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":8265,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/posts\/4869\/revisions\/8265"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media\/5372"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=4869"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/categories?post=4869"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/directcm.com\/es\/wp-json\/wp\/v2\/tags?post=4869"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}